CCT244747

CCT244747名称

中文名：CCT244747
英文名：(R)-3-((1-(dimethylamino)propan-2-yl)oxy)-5-((4-methoxy-5-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)pyridin-2-yl)amino)pyrazine-2-carbonitrile
英文别名：更多

CCT244747生物活性

描述：CCT244747是一种有效的,可口服的,高度选择性的CHK1抑制剂,IC50值为7.7nM；CCT244747可废除G2检查点,IC50值为29nM。
相关类别：信号通路>>细胞周期/DNA损伤>>检查点激酶(Chk)研究领域>>癌症
靶点：

Chk1:7.7nM(IC50)

体外研究：CCT244747很差地抑制CHK2(IC50>10μM)和CDK1(IC50>10μM)。CCT244747具有针对CHK1,RSK1,RSK2,AMPK,BRSK1,IRAK1和TrkA的有效活性,具有>80％的抑制。CCT244747(10μM)对其他离子通道的抑制率<25％,包括hNav1.5,hKv4.3/hKChIP2,hCav1.2,hKv1.5,hKCNQ1/hminK,hHCN4[1]。CCT244747抑制FLT3,IC50为600nM。CCT244747(0.5μM)克服了人结肠癌细胞系中基因毒性诱导的S和G2细胞周期停滞。CCT244747抑制细胞CHK1功能,其中IC50为29nM至170nM,用于HT29,SW620,MiaPaCa-2和Calu6细胞系中的细胞G2检查点消除(MIA,有丝分裂诱导测定);GI50介于0.33和3μM之间。CCT244747(0.3μM)在HT29和SW620结肠癌细胞系中抑制SN38和吉西他滨诱导的CHK1活性,这与细胞周期停滞的消除,DNA损伤和细胞凋亡的诱导相关[2]。CCT244747(0.5-2.0μM)增加膀胱癌和头颈癌细胞系(T24,RT112和Cal27)对辐射的敏感性[3]。
体内研究：CCT244747(100mg/kgpo,qd7d)显着降低人肿瘤异种移植物中的肿瘤负荷。CCT244747(100-300mg/kg,口服)在HT29结肠肿瘤异种移植物中抑制吉西他滨诱导的pS296CHK1长达24小时[1]。CCT244747(75mg/kg,口服)与吉西他滨组合在HT29结肠肿瘤异种移植物和Calu6人肺癌异种移植物中具有有效的抗肿瘤作用。CCT244747(150mg/kg口服)也显示在SW620人结肠肿瘤异种移植物中使用伊立替康的抗肿瘤活性[2]。CCT244747(100mg/kg,po)在Cal27异种移植物中表现出放射增敏活性[3]。
激酶实验：在微流体测定中测量CHK1激酶活性，所述微流体测定监测磷酸化产物与其底物的分离。使用含有CR-8（500nM）的分离缓冲液在EZReaderII上进行测定。ECHO®550声学分配器用于直接在384个聚丙烯测定板中产生重复的8pt稀释曲线。对于每种化合物，使用在100％DMSO中的50μM储备浓度。每孔分配的DMSO总量为250nL，得到最终测定浓度为2.5％DMSO，化合物浓度为0.5-1000nM。向该测定板中，6PLCHK1（2nM终浓度，内部蛋白质制备），2PL肽10（5-FAM-KKKVSRSGLYRSPSMPENLNRPR-COOH，1.5PM终浓度）和2PLATP（终浓度90PM）全部稀释于激酶缓冲液（HEPES50mM，NaN30.02％，BSA0.01％，原钒酸钠0.1mM，DTT1mM，MgCl22mM，Tween200.1％）中。将板密封并离心（1分钟，1000rpm），然后在室温下孵育1小时。加入分离缓冲液（90μL）终止反应。使用12-sipper芯片在EZReaderII上读取板，仪器设置为-1.5psi和1750ΔV。自动产生来自底物的产物转化百分比，并相对于空白孔（不含酶和2.5％DMSO）和总孔（含有所有试剂和2.5％DMSO）计算抑制百分比。使用log（抑制剂）与响应的非线性回归拟合以及可变斜率方程[1]，在GraphPadPrism5中计算IC50值。
细胞实验：使用96小时磺酰罗丹明B测定（SRB）评估化合物细胞毒性和CHK1抑制剂增强SN38（拓扑异构酶I抑制剂伊立替康的活性代谢物）和吉西他滨（抗代谢物）细胞毒性的能力。将HT29或SW620细胞以1.6至3.2×103个细胞/孔接种于96孔板中，体积为160μL培养基，并在处理前使其附着36小时。对于细胞毒性测定，将CHK1抑制剂（DMSO中的10mM储备液）在培养基中从250PM的起始浓度连续稀释，然后将40μL一式四份加入适当的孔中，使最终浓度范围为50-0.1PM（10个浓度））。将基因毒性剂（SN38;DMSO中的10mM储备液）在培养基中从2PM的起始浓度连续稀释，并将40μL一式三份加入到每个孔中，得到200-0.39nM的终浓度（10个浓度）。将细胞在37℃，湿润的5％CO2环境中孵育96小时（四次倍增），然后固定并用SRB染色。包括适当的对照，结果表示为相对于未处理的对照，抑制细胞生长50％所需的试验化合物浓度（SRBIC50）。增强测定包括将固定的SRBIC50浓度的吉西他滨或SN38以20μL培养基（10x终浓度）的体积加入到每个孔中，一式四份并混合1分钟。将CHK1抑制剂（10mM储备液）从培养基中50μL的起始浓度连续稀释，每孔加入20μL，一式四份，得到5-0.039PM的终浓度范围（8个浓度）。混合1分钟后，在固定和SRB染色之前，将细胞在37℃下在潮湿的气氛中温育96小时（四次倍增）。包括未处理和基因毒性单独处理的对照，结果表示为抑制细胞生长50％所需的CHK1抑制剂浓度（增强IC50）。增强指数（PI）用于衡量CHK1抑制剂增强SN38或吉西他滨细胞毒性的能力，是SRBIC50与增强IC50的比值（PI=SRBIC50/增强IC50）[1]。
动物实验：将雌性BALB/c小鼠（6周龄）保持在受控环境中，随意提供食物和无菌水。在实验时动物体重为20（±2）g。通过将化合物溶于10％DMSO和5％Tween20的85％盐水中来制备给药溶液。化合物分别静脉内和口服给药。在接受单次静脉推注注入侧尾静脉之前将动物加热。口服给药是通过口服强饲法。在选定的时间点（给药后1小时和6小时）通过心脏穿刺在麻醉下将血液收集到肝素化注射器中，转移到微量离心管中，并以4500×g离心2分钟以获得血浆。通过高效液相色谱串联质谱法在三重四极杆仪器上进行定量分析，使用多重反应监测选择的过渡，用作为内标的olomoucine。对测量的基质中浓度为2-1000nM的标准曲线进行定量。质量控制包括在25,250和750nM的水平。如果需要，将样品稀释在目标基质中[1]。
参考文献：

[1].LainchburyM,etal.Discoveryof3-alkoxyamino-5-(pyridin-2-ylamino)pyrazine-2-carbonitrilesasselective,orallybioavailableCHK1inhibitors.JMedChem.2012Nov26;55(22):10229-40.

[2].WaltonMI,etal.CCT244747isanovelpotentandselectiveCHK1inhibitorwithoralefficacyaloneandincombinationwithgenotoxicanticancerdrugs.ClinCancerRes.2012Oct15;18(20):5650-61.

[3].PatelR,etal.AnorallybioavailableChk1inhibitor,CCT244747,sensitizesbladderandheadandneckcancercelllinestoradiation.RadiotherOncol.2017Mar;122(3):470-475.

CCT244747物理化学性质

分子式：C20H24N8O2
分子量：408.45700
精确质量：408.20200
PSA：114.01000
LogP：2.29788
储存条件：2-8℃

CCT244747英文别名

：CCT244747

CCT244747重点介绍

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心血管疾病（CVD）是全世界死亡和残疾的主要原因。 CVD包括心脏疾病，脑血管疾病和血管疾病。 由动脉粥样硬化引起的冠心病和脑血管疾病是最常见的心血管疾病。 其他不太常见的CVD形式包括风湿性心脏病和先天性心脏病。 通过减少烟草使用，缺乏身体活动和不健康饮食等行为风险因素，可以预防大部分心血管疾病。

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